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一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法

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专利号 2020100644131 专利名称 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法
专利类型 发明专利 国际分类 C12Q1/70(2006.01),C12Q1/686(2018.01)
申请人 湖南农业大学 申请地址 410128 湖南省长沙市芙蓉区农大路1号
发明人 黄国华 申请日期 2020-01-20
下证状态 未知 更新时间 2025-01-10 08:17:27
专利摘要 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法,是将含囊泡病毒的待测样品超声破碎,然后稀释、过滤,用其感染对数生长期细胞1h,收集细胞悬液、计算细胞数量,提取总DNA;对上述DNA进行qPCR检测,以含有该片段的pGEM‑T载体为标准品,绘制绝对定量PCR检测的标准曲线。根据样品的Ct值计算出每样品中含有的病毒基因组拷贝数。根据感染复数公式,计算感染每个细胞的平均病毒粒子数量,即感染时病毒与细胞数量的比值计算病毒滴度。本方法测定囊泡病毒滴度,当样品浓度为1×102~1×1011病毒基因拷贝/mL时检测时间仅需4‑6h,耗时短,与传统的病毒滴度检测方法相比,操作简单快捷,准确,极大提高了囊泡病毒滴度的检测效率,特别适用于囊泡病毒滴度的快速测定。

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身份证
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