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一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法

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专利号 2016112022231 专利名称 一种仔猪小肠上皮细胞分级分离方法
专利类型 发明专利 国际分类 C12N5/071(2010.01)
申请人 申请地址 410081湖南省长沙市麓山路36号
发明人 申请日期 2016-12-23
下证状态 未知 更新时间 2025-01-10 08:04:32
专利摘要 本发明公开了一种仔猪肠上皮细胞分级分离方法,包括以下步骤:1、取长度为60‑90cm小肠肠段,肠腔中灌注37℃预热充氧磷酸缓冲液100‑150mL,两端用止血钳夹住后,于37℃水浴振荡器中孵育30分钟,震荡速度为70转/分钟;2、弃磷酸盐缓冲液,灌注细胞分离液100‑150mL,继续于37℃水浴振荡器中分别孵育2.5小时,震荡速度为70转/分钟,分别于不同时间点收集细胞分离液并灌注新的细胞分离液;3、所收集细胞分离液于4℃、400g离心10分钟,所得沉淀即为肠上皮细胞,根据孵育时间由前至后收集的细胞依次为沿隐窝‑绒毛轴从绒毛顶端至隐窝底部不同部位细胞。本发明分离的细胞为体内研究小肠上皮细胞分化机制、营养吸收代谢和相关疾病药物开发提供了新的技术方法。

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