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一种基于T3DNA连接酶的镉离子检测方法

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专利号 2021103657759 专利名称 一种基于T3DNA连接酶的镉离子检测方法
专利类型 发明专利 国际分类 C12Q1/6844(2018.01)
申请人 申请地址 210046江苏省南京市栖霞区文苑路1号
发明人 李昺之 申请日期 2021-04-06
下证状态 未知 更新时间 2025-01-10 07:06:33
专利摘要 本发明公开了一种基于T3 DNA连接酶的镉离子检测方法,它是通过设计一种DNA模板,当目标物镉离子存在的情况下,目标物拉近了链两端的距离,使得3’端和5’端互补配对,形成平末端;在T3 DNA连接酶的作用下,使该模板环化;再加入一段与环状模板互补配对的寡核苷酸链,作为后续扩增反应的引物;在加入phi 29 DNA聚合酶的作用下,开启滚环扩增反应,得到较长的一段核苷酸链条;在得到的产物中加入荧光染料SYBR Green I,使染料插入到DNA链条中,在517‑537nm的激发波长下,用紫外分光光度计进行检测样品,然后在487‑507nm的激发波下测得荧光强度;使用Real‑Time PCR方法对镉离子进行检测,验证本发明的方法的准确性。

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