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一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法
院校-
发明专利
专利类型 -
未知
专利状态 -
2018101927978
专利号
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专利信息
数据仅供参考，具体信息可联系在线顾问
| 专利号 | 2018101927978 | 专利名称 | 一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法 |
|---|---|---|---|
| 专利类型 | 发明专利 | 国际分类 | C12N5/10;C12N15/85;C12N15/90 |
| 申请人 | 湖南农业大学 | 申请地址 | 湖南省长沙市芙蓉区农大路1号 |
| 发明人 | 王爱兵 | 申请日期 | 2018-03-08 |
| 下证状态 | 未知 | 更新时间 | 2025-01-10 08:20:54 |
| 专利摘要 | 一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法，是设计两个针对HMGCR基因的CRISPR/Cas9靶标序列，体外合成gRNA单链，经过退火处理获得两个gRNA双链DNA目的插入片段，并分别插入PX459（pSpCas9（BB）‑2A‑Puro）V2.0载体中，获得靶向HMGCR基因两个不同位点的质粒；分别转染该两质粒至PK15细胞中，以嘌呤霉素处理细胞，提取处理后的细胞基因组DNA进行PCR扩增，PCR产物变性、退火后再利用T7E1进行HMGCR基因敲除鉴定。本方法能用于分析HMGCR基因敲除后的序列和mRNA表达情况，能利用PCR结合T7E1酶处理方法验证有无脱靶现象，从而确定基于靶标序列HMGCR‑gRNA的特异性。本方法不仅可应用于细胞、动物模型中实现HMGCR基因的定点敲除，而且对于实现其它基因的敲除具有参考价值，并具有效果好、简便、经济、时间短等优点。 | ||
交易流程
转让材料
| 买卖双方需提供 | 平台提供 | 转让后买方可获得 | ||
|---|---|---|---|---|
| 企业 | 个人 | 专利代理委托书 专利权转让协议 办理文件副本请求书 发明人变更声明 | 专利证书 手续合格通知书 专利登记簿副本 | |
| 买方 | 企业营业执照 企业组织机构代码证 | 身份证 | ||
| 卖方 | 企业营业执照 专利证书原件 | 身份证 专利证书原件 | ||
服务保障
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